真红 （しんく）Reiner RubinCV: TV版-澤城美雪/Drama CD版-堀江由衣
薔薇少女系列的第五人偶,人工精灵是荷莉 （ホーリエ）.本作女主角,有着苍蓝色的双瞳,以及一头非常漂亮的金发,身作鲜红大衣.于纯第一个缔结契约的薔薇少女.个性自傲,自尊心十分强,有着女王般的气质,对去他人说话多数以命令口吻,将纯当作自己的仆人,在樱田家有着绝对的权威.由于爱叫纯做事,被纯称做"诅咒人偶",偶尔会出现一些十分可爱的举动.她于另外一名薔薇少女水银灯十死对头,她们一但遇见就不会安宁.平时的兴趣十看书,以及观看木偶剧库苦贞探.阅读的说只要十关于炼金术.讨厌猫.对于爱丽丝游戏,希望能够以自己的方式解决.口头禅「…なのだわ」. 水銀燈 （すいぎんとう） Mercury LampeCV: TV版-田中理惠/Drama CD版-能登麻美子
薔薇少女系列的第一人偶,人工精灵是美美 （メイメイ）.自视颇高,个性阴暗孤高,对其他人偶并不放在眼里.对于被真红骂为"垃圾"非常的反感.由于对父亲极端的爱,对自己能否在爱丽丝游戏中获胜十分的看重,不惜一切代价也要成为爱丽丝.视真红为眼中钉,甚至连上一次与真红战斗也能分秒不差的说出来.主要武器,也视最大的特征就视背后的黑色翅膀,可以以上面的羽毛为武器而攻击敌人,同时也有和真红类似的人偶操控能力.服饰上有象征着反逆的反十字.由于人物设定和声优的关系是分的受欢迎在动画第一期里面,自己并没有和媒介递交契约,但是却能和有了媒介的真红在战斗中平分秋色,后来才与柿崎惠订下了契约.对于其它人而言,柿崎惠对水银灯视特别的 雛莓 （ひないちご）Kleine BeereCV: TV版-野川櫻/Drama CD版-金田朋子
蔷薇少女系列的第六人偶，人工精灵是贝莉贝尔 （ベリーベル）。初登场时与柏叶巴订下契约。雏莓个性爱哭怕寂寞，虽然看起来人畜无害，但在跟真红进行爱丽丝游戏中差点把原媒介柏叶巴的力量消耗殆尽，在后悔之餘赶紧解除契约才保住了巴的生命，但因此失去了成為爱丽丝的资格。在败给真红后以真红為间接媒介从纯获得活动的力量，并成為真红的僕人，从此就在樱田家住下来。 主要攻击武器是从身上蔓生的草莓藤来困住敌人的行动。喜爱吃甜食，特别是「草莓大福」以及樱田纪作的「花蛋汉堡」 （花丸ハンバーグ）。兴趣是涂鸦，以及观看电视布偶剧“侦探库库”，平常在嘴边也常常哼著自己随意唱的歌。由於雏莓天真单纯，因此总是被翠星石欺负。雏莓受到纪的溺爱，总是很依赖别人，但在跟眾人相处之下也慢慢改变了。雏莓被翠星石戏称「小小鬼头莓」 （チビチビ苺）。雏莓似乎不常使用人工精灵，导致人工精灵自信心不足而畏畏缩缩。雏莓的说话常加上「...なの～」的语尾，喜欢将草莓大福称為「うにゅ～」，同时这也是她的口頭禪之一。 翠星石 （すいせいせき）Jade SternCV: TV版-桑谷夏子/Drama CD版-水樹奈奈 {Drama CD)
蔷薇少女系列的第三人偶。人工精灵是大树 （スィドリーム），名称出自萧志美 （Anna Sui）的品牌香水「Sui Dream」。跟第四人偶的苍星石是双胞胎人偶，特徵是两隻眼不同色，右眼是红色左眼是翡翠绿，服饰是巴伐利亚风的造形。拥有「园丁的喷壶」 （庭师の如雨露），能给与心之树养份令它成长，与苍星石的「园丁之剪」是一对的，合称「梦之园丁」 （梦の庭师），可以使用人工精灵开啟通往梦境之门。战斗时主要将如雨露洒出甘露，所及之处的植物会快速成长成巨大的藤蔓困住敌人的行动。她是第二个与纯订下契约的人偶。对著对陌生人会感到害怕，并总是想要躲起来，然而看来文静但说话却相当狠毒，对刚见面的纯就叫他「小鬼头人类」 （チビ人间）。个性并不老实，来到樱田家后常常对纯跟雏莓恶作剧，因此被纯称為「黑心人偶」 （性恶人形） （所以有读者叫她腹黑石）。
虽然常常表现出坏心的一面，但是内心其实是很善良的，对於战斗也总是无法狠下心肠。翠星石虽然嘴巴上得理不饶人，总是数落纯，然而却很在意纯，是标準「外冷内热」 （ツンデレ）型。曾在纯心情低落的时候给他亲手造的烤饼乾打气 （漫画第31话），也曾因纯与真红过於亲近而吃醋 （漫画第24话或动画第二期第5话）。对於作点心相当上手，同时也是冲烘培茶的能手 （动画二期第四话），但似乎不懂得如何使用微波炉与吸尘器而搞的一团乱 （动画第二期第五话或漫画第24话）。翠星石的说话常加上「...ですぅ」的语尾，近似於中文「...的说」，但多数為无意义的句尾助词。
蒼星石 （そうせいせき）Lapislazuli Stern　　CV: TV版-森永理科
蔷薇少女系列的第四人偶。人工精灵是雷比卡 （レンピカ），名称出自法国品牌香水「Lolita Lempicka」，这款香水的特色是分為女用与男用二种。翠星石的双胞胎妹妹，也是两眼不同色，但顏色跟翠星石左右相反。苍星石穿著男装。拥有能除去妨碍心之树成长的杂草的「园丁之剪」 （庭师の鋏），战斗也是使用园丁之剪进行攻击，同样也能使用人工精灵开啟梦境之门。 虽与翠星石為双胞胎但是个性却大不相同，有著成熟与冷静的思绪，对主人的忠诚度很高。在漫画原作的媒介是结菱一叶，而动画版是柴崎元治。在漫画中，苍星石因攻击主人的心而失去了蔷薇圣母，她的蔷薇圣母其后被突然出现的水银灯夺去，因此而失去活动能力并成為一具普通的人偶。苍星石虽然没有特别的语癖，但她会用第一人称「僕 （ボク） （女子通常用「私/あたし」作為第一人称）」，来特显苍星石男性化的性格。参照→ボク少女 金絲雀 （カナリア，Kanarienvogel） CV：志村由美 (TV)
蔷薇少女系列的第二人偶。自称為蔷薇少女中第一头脑派的策士，但每次的行动总以失败告终，往往归咎失败原因為事情超出预想之外。為了抢夺真红等人的蔷薇圣母而试图入侵樱田家，每次都以失败而告终。 使用小提琴演奏出带有攻击能力的音波进行攻击，动画第二期第七话使用的招式有「第一乐章 攻击的华尔滋」 （攻撃のワルツ）、「第二乐章 追击的卡农」 （追撃のカノン）、「不协和音」 （ディスコード）、「反击的变奏曲」 （反撃のパルティータ）与「最终乐章 破坏的交响曲」 （破壊のシンフォニー），令人意外的有著很高的战斗能力。动画第二期十一话使用的招式有「野蔷薇之序曲」 （野蔷薇のプレリュード）、「俯首士兵之进行曲」 （项垂れ兵士のマーチ）。媒介是小美，也非常喜欢小美。喜欢野餐，特别爱吃加糖的日式煎蛋 （玉子焼き）。似乎是最常使用人工精灵的人偶，随时带在身边并常常跟他说话或讨论战术，因此默契也相当好。金丝雀的说话常加上「...かしら？」的语尾，近似於中文「...吗？」、「...吧？」、「...不是嘛？」的疑问句尾助词，但同样多数為无意义的。 薔薇水晶 （ばらすいしょう，Rosen Kristall） CV：後藤沙緒里 (TV)
动画第二期原创角色，罗真的弟子槐仿照蔷薇少女系列而製作的偽冒的第七人偶，没有人工精灵。充满谜团的蔷薇少女。独眼，以紫色玫瑰造型的眼罩覆於左眼，衣服以淡紫色為主。战斗能力相当强，能够產生出水晶作出攻击。沉默寡言，但不知為何经常重复别人的说话，面无表情，遇上强敌时会显露出笑容，属於好战派。动画第二期的结局裡蔷薇水晶因无法承受其他六位蔷薇少女的蔷薇圣母而崩坏。

樱田纯 （桜田ジュン） CV：真田アサミ (TV)/小林沙苗 (Drama CD)
本作的男主角，国中二年生，因為被同学发现自己热衷於娃娃与设计衣服等女孩所作的事，令自尊心严重受损而不愿上学，总是躲在房间裡进行网路邮购。对於亲姊姊樱田纪的关心相当不以為然，常用斥责或命令的口气与之交谈，然而在遇上真红等人偶后渐渐的打开心房。 被真红视為僕人且总是被使唤，本身虽不愿意但也无可奈何，同时也因為身高的关係被翠星石戏称為「小鬼头人类」 （チビ人间）。纯拥有修復娃娃的高超裁缝手艺，曾将把支离破碎的娃娃復修并将其迷失的灵魂唤回，甚至能将真红失去的断臂完整修復。最初与真红订下契约，在雏莓败给真红后也透过真红间接使用纯的力量，而之后在危急的情况下又与翠星石缔结契约，实质上為三名人偶的媒介。

樱田典子 （桜田のり） CV：力丸乃りこ (TV)/久川綾 (Drama CD)
纯的亲姐姐，高中生，代替在海外工作的双亲照顾纯，非常关心纯的状况。有著天然呆的个性，常被纯及真红等人命令。家事全能并拥有高超的厨艺，拿手料理是深受人偶们喜爱的「花蛋汉堡」 （花丸ハンバーグ）。平常的个性很随和及温柔，即使纯总用命令的口气跟她说话也无所谓，但是一旦生气起来却很可怕 （动画一期第五话或漫画第14话）。在学校是长曲棍球 （Lacrosse ラクロス）社的一员

柏叶巴 CV：仓田雅世 (TV)/川澄綾子 (Drama CD)
纯的青梅竹马，同时也是纯的同班同学，雏莓的原媒介。最初与雏莓订下契约时因為疼爱，导致对雏苺的过份放纵。在雏莓与真红进行爱丽丝游戏时，由於雏莓过度使用力量导致巴陷入濒死边缘，在雏莓紧急解除契约下捡回一命。在学校是剑道社的社员，自幼跟父亲学习剑道，同时也担任学级委员，是个模范生。

山本君 CV：间岛淳司 (TV)
动画版原创角色，暗恋典子的同班同学，每次想约典子的时候总是遇上不幸的状况而失败。

柴崎元治 CV：西川几雄 (TV)
动画版原创角色，动画版的苍星石媒介，是个年逾半百的鐘錶店师父，在失去儿子与妻子昏迷不醒的双重打击下，将苍星石误认為儿子「一树」 （かずき），对苍星石有著扭曲的亲情而不让苍星石在箱子裡睡觉，在妻子甦醒后承认儿子已死的事实。

柿崎惠 （柿崎めぐ） CV：河原木志穗 (TV)
是一个患有先天性重疾的少女，对自已的命运感到无奈而厌世。称自己是「坏掉的孩子」（壊れた子），经常要求与水银灯与自己订下契约，希望水银灯藉此将自己的生命完全吸乾。在动画版中，两人一相遇便马上订下契约，漫画版中则到第七期的时候，两人才结下契约。经常一边唱歌一边等候水银灯回来。

草笛美子 （草笛みつ） CV：川瀨晶子 (TV)
金丝雀的媒介，是个人偶狂热者，职业是服装设计师。由於本身热爱人偶而相当溺爱金丝雀，对於其他蔷薇少女的也非常感兴趣。料理也很在行，总是帮金丝雀準备便当，其中的糖煎蛋更是金丝雀的最爱。

白崎 CV：樱井孝宏 (TV)
动画版原创角色，神秘的人偶店店员，其真面目為拉普拉斯之魔。

槐 （エンジュ） CV：小野大辅 (TV)
动画版原创角色，神秘的人偶师，动画第二期的最终话自称罗真是他的师傅，因此能仿制出蔷薇水晶。
蔷薇 （ローゼン）
製作出梦幻的蔷薇少女系列人偶的神秘人偶师，也就是人偶们口中的「父亲大人」，為了得到最完美的少女「爱丽丝」而使用以鍊金术製成的蔷薇圣母製作出七名蔷薇少女，然而他认為没有一个人偶达到爱丽丝的境界。在极度悲伤之下失踪，现在可能於n领域的某处。他让人偶们进行以互相夺取蔷薇圣母為规则的「爱丽丝游戏」，目的是让夺得所有蔷薇圣母的人偶成為爱丽丝。

莎拉(サラ) CV：真田アサミ (TV)
英国人，真红最初的媒介。隐瞒父母，私底下养猫加上与真红缔约。后来在苍星石与翠星石前往下个年代后，真红决定不在此时代停留，因此解除了与莎拉的契约，朝向下个年代前进。

结菱一叶
漫画原作苍星石的契约者，仅在漫画登场。因為双胞胎弟弟结菱二叶与爱人远走高飞而深受背叛的感觉，当二叶在船难中丧身时，想要利用翠星石与苍星石对倖存的二叶的爱人实行报復行动，但翠星石因无法认同而独自离开到樱田家。

结菱二叶
一叶的双胞胎弟弟，仅在漫画中版被提及，与未婚妻私奔却不幸死於船难之中。

梅冈老师
纯的班导师，仅在漫画登场，年轻认真。他是造成纯成為隐闭青年的原因之一，很想帮助纯回到校园生活，但是不了解其中的原委。

蔷薇少女 （ローゼンメイデン）
是传说中拥有生命的不可思议人偶，製作者是神秘的人偶师罗真 （ローゼン）。製作非常细腻，酷似真人，但从未在市面上流通过。
媒介 （ミーディアム）
与蔷薇少女订下契约的人类。成為媒介者会提供自已的能量给予蔷薇少女活动的力量，在有媒介的情况下，蔷薇少女才能在现实世界中使用特殊能力，而战斗时媒介的存在对於胜负也是相当重要的因素。
蔷薇戒指 （蔷薇の指轮）
媒介与蔷薇少女之间契约的证明，在契约取消前不会消失也无法取下。在原作漫画中缔结契约的方式是契约者由蔷薇少女取得戒指，戴上后亲吻戒指表示契约形成，而动画版则是契约者必须亲吻在蔷薇少女手上的戒指，表示契约形成，此时会在自己手指上形成戒指。若同时与两名以上的蔷薇少女缔结契约，戒指会合為一体，体积也会变大。而人偶在过度使用力量的情形下，导致媒介的力量用尽的话，媒介会被戒指吞噬，最后与人偶合為一体。解除契约时，戒指会破碎消失，同时人偶也无法再使用媒介的力量，也代表人偶放弃了爱丽丝游戏，失去成為爱丽丝的资格 （动画中，解除契约的方式是由人偶亲吻媒介手上的戒指）。
爱丽丝 （アリス）
比任何花都要高尚，比任何宝石都要无暇。唯一纯洁无暇而且象徵完美的少女。是蔷薇少女们所追求的目标。
爱丽丝游戏 （アリスゲーム）
蔷薇少女的宿命，必须互相战斗夺取彼此的蔷薇圣母，最终获胜取得全部蔷薇圣母的人偶可成為爱丽丝。
蔷薇圣母 （ローザミスティカ）
蔷薇少女生命的来源，失去蔷薇圣母的蔷薇少女就会成為一般的人偶。而获得别人的蔷薇圣母的人偶，可以增强自己的力量。（动画二期中，获得其他蔷薇圣母的人偶会继承原有者的能力）
n领域 （nのフィールド ）
虚与实，正与负，什麼都存在也什麼都不存在的世界。人偶们可以以类似镜子的物质 （镜子、玻璃、水面）当作进出n领域的门。而每个人偶也都拥有属於自己的n领域，在自己的领域之中战斗会比较有利。人偶在没有媒介在身旁的情形下，只能在n领域中停留30分鐘，超过就会丧失活动能力。
世界树
存在於梦世界的巨树，连接著所有人类的心之树。
潜意识之海 （无意识の海）
存在於n领域中的特殊区域，夹杂现在过去未来的时间洪流，包含所有一切思绪与记忆之海，若走在浅滩上则会看到许多幻觉。参照→潜意识 人工精灵 蔷薇少女所操控的助手。拥有不可思议力量的精灵，每个蔷薇少女都有一个，帮助蔷薇少女寻找媒介，战斗时也是蔷薇少女不可或缺的帮手。
皮箱 （鞄）
蔷薇少女沉睡时所放置的箱子，镶著蔷薇的标誌，蔷薇少女平时也必须在皮箱内睡觉才能获得真正的休息。也可将皮箱当作飞行交通工具。
父亲大人 （お父様）
製作出蔷薇少女系列的人偶师，罗真。